基于全基因组测序的耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌耐药基因、毒力因子及同源性分析

摘要：目的 通过应用全基因组测序(whole genome sequencing, WGS)技术分析某三级医疗机构耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不 动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, CRAB)的耐药基因、毒力因子及同源性。方法 收集该院2020年1月至3月 重症监护病房(Intensive care unit, ICU)、神经外科分离的11株医院感染CRAB菌株，通过二代测序平台进行全基因组测序, 应用 基因组流行病学中心(Center for genomic epidemiology, CGE)ResFinder 4. 0软件分析其耐药基因型，并应用MORPHEUS在线制作 热图，应用毒力因子数据库(virulence factors of pathogenic bacteria, VFDB)VFanalyzer软件筛选毒力因子，应用MLST软件检测菌 株的ST型，应用Kaptive软件检测荚膜型，应用CSI Phylogeny 1. 4软件及FigTree v1. 4. 4软件构建最大似然树(maximum likelihood tree, MLT)以分析其同源性。结果 11株CRAB对亚胺培南、美罗培南、头孢菌素、环丙沙星均呈现耐药，而对阿米卡星、左氧 氟沙星耐药的菌株株数较少。11株CRAB共检测出18种耐药基因，11株同时携带碳青霉烯酶耐药基因blaOXA-23和blaOXA-66，β-内酰 胺酶耐药基因以blaTEM-1D和blaADC-25为主，大部分菌株携带多种外排泵相关耐药基因及抗菌药物修饰酶耐药基因。11株CRAB均携 带多种毒力因子，包括外膜孔蛋白、脂多糖、生物膜、外排泵、磷脂酶和效应蛋白等，如OmpA、Lps、Csu、Pga、Ade、Plc、 Bas、Bau、Ent、Hem、Aba、Bfm、Pbp和Kat等。11株CRAB均为ST2-K22型，同源性分析结果显示C组内同源性关系相近，存 在院内传播的可能。结论 该院CRAB的耐药性、毒力特征复杂多样，同源性分析显示该院存在1种优势克隆株，该克隆株有医 院内传播的风险。     

IL - 22与糖尿病关系的研究进展

目的 本文总结了近年来白细胞介素22 (interleukin 22, IL - 22)与糖尿病(diabetes mellitus，DM)发病关系的研究，希望能为DM的防治及病情评估提供较为可行的策略靶点。方法 本文资料来源于中国知网、PubMed等数据库，以IL - 22、糖尿病、胰岛素、糖异生等关键词进行检索得到。结果 IL - 22可增加胰岛素分泌、促进胰岛素信号转导及维持葡萄糖稳态，参与DM发生、发展及病情演变。结论 IL - 22可通过多个环节参与DM的发病及病情演变，以IL - 22为靶点对于防治DM具有重要参考价值。     

基于理论域框架的ICU护士执行身体约束缩减行动障碍因素的质性研究

目的：探讨ICU护士执行身体约束缩减行动的障碍因素，为制定身体约束标准化管理方案提供依据。方法：基于理论域框架（TDF）制定访谈提纲，采用目的抽样法对天津市某三级甲等医院的12名ICU护士进行半结构式访谈，按照TDF的相关领域对转录后的资料进行归类，用内容分析法对访谈资料进行分析。结果：ICU护士对身体约束缩减行动理解存在偏差、对约束替代措施内容的不熟悉是其执行身体约束缩减行动的障碍因素之一；身体约束缩减方案评估工具、决策流程的不规范对缩减约束行动的开展造成了一定阻碍；环境因素的限制及对缩减约束结果的担忧，使ICU护士没有足够的信心去执行；科室缺乏支持缩减约束的组织氛围，难以引起护士对执行约束缩减行动的重视，进而削减执行的动力。结合理论域框架将上述因素分别归属为知识、自我效能、环境背景和资源、社会影响、行为规范5个领域。结论：知识、自我效能、环境背景和资源、社会影响及行为规范为ICU护士执行身体约束缩减行动的障碍因素。科室要在明确障碍因素的基础上，加强领导层对执行缩减约束的重视和支持。制定缩减约束评估决策规范化流程以及培训方案，倡导团队协作，创造支持身体约束缩减行动的组织氛围，坚定ICU护士执行缩减约束的信心，促进身体约束缩减行动的持续实施。     

基于HPLC指纹图谱、多指标成分含量测定结合化学计量学的怀牛膝质量评价＊

目的 本实验采用HPLC方法建立来自3个产地15批怀牛膝药材的指纹图谱，并对β-蜕皮甾酮，25R-牛膝甾酮，25S-牛膝甾酮进行含量测定，同时通过化学计量学的方法对15批怀牛膝进行质量评价。方法 选用Waters SunFire C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，检测波长280 nm，以乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱，流速为1.0 mL·min^-1，柱温25℃，进样量10 μL。以β-蜕皮甾酮峰为参照峰，运用软件《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对15批怀牛膝药材进行相似度分析，使用Metabo Analyst 5.0网站进行聚类热图分析，使用SIMCA 14.1软件进行PCA和PLS-DA分析。结果 标定了31个共有指纹峰，指认了3个已知成分，并对其进行含量测定，化学计量学分析结果将15批怀牛膝药材样品分为3类，并且筛选了不同产地间潜在的差异性成分。结论 该方法具有良好的精密度、重复性以及稳定性，可为怀牛膝的质量评价与控制提供科学依据及参考。     

多功能套针浮刺疗法治疗神经根型颈椎病——一项随机对照观察研究＊

目的 评价多功能套针浮刺疗法对神经根型颈椎病的临床疗效。方法 选取256例神经根型颈椎病患者，按随机数字表法分为观察组与对照组各128例。观察组应用多功能套针浮刺疗法进行干预，对照组为常规针刺治疗。两组患者均治疗7天。分别于治疗前后观察两组患者的简化McGill疼痛问卷（SF-MPQ）、国际标准颈椎功能障碍指数（NDI）和田中靖久颈椎病症状20分法量表评分，并于治疗结束后3个月观察复发率。结果 两组患者治疗后的SF-MPQ量表评分、NDI量表评分及田中靖久颈椎病症状20分法评分与治疗前相比均有改善（P<0.05），且观察组优于对照组（P<0.05）；两组患者于治疗后3个月随访，SF-MPQ量表评分与治疗后相比均有改善，且观察组优于对照组（P<0.05）；观察组临床疗效总有效率为96.88%，愈显率为81.25%；对照组总有效率为78.13%，愈显率为46.88%，观察组优于对照组（P<0.05）。结论 应用多功能套针浮刺疗法治疗神经根型颈椎病临床疗效显著，见效较快，可有效降低其复发率，且作用稳定，效果持久，值得临床推广应用。     

基于苗药五藤膏外敷对CIA大鼠炎性骨破坏的影响探讨苗医外治就近驱邪的作用＊

目的 通过研究明确苗药五藤膏外敷缓解胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠关节局部炎症和骨破坏的机制，证实苗医外治就近驱邪的作用。方法 将70只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、苗药五藤膏高、中、低剂量组、扶他林组及IL-17阻断组，每组10只。除空白组外，其余6组均构建CIA模型，并给予相应的外敷治疗。观察大鼠一般情况，HE染色进行病理学分析，TRAP染色检测OC生成，ELISA检测各炎症因子的含量，RT-PCR和WB分别检测RANKL的基因及蛋白表达。结果 苗药五藤膏能改善CIA大鼠破骨细胞浸润及关节病理性结构，并降低RANKL蛋白、基因表达以及TNF-α、IL-1、IL-6、IL-17含量。结论 苗药五藤膏外敷剂对CIA大鼠的治疗机制可能与降低致炎因子的分泌，抑制RANKL及OC的表达相关。     

藏药细叶亚菊的质量标准研究＊

目的 建立细叶亚菊的质量标准，为其质量控制和合理开发利用提供科学参考。方法 采用性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱法（TLC）对细叶亚菊进行定性分析；参照《中国药典》（2020年版）通则方法对细叶亚菊水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物进行含量检查；利用高效液相色谱法（HPLC）测定细叶亚菊中绿原酸、异绿原酸A的含量。结果 确定了细叶亚菊的药材性状及显微特征。TLC鉴别显示，供试品（细叶亚菊药材）与对照品（绿原酸、异绿原酸A）在相应位置上均显示相同颜色的荧光斑点。13批细叶亚菊水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物的含量分别为8.55%-13.07%、6.81%-12.68%、1.11%-3.53%、8.41%-11.64%；绿原酸、异绿原酸A的含量范围分别为0.072%-0.440%、0.283%-1.324%（n=3）。结论 本研究建立的方法准确稳定，可为细叶亚菊的质量控制提供参考。暂规定细叶亚菊水分不得过12.0%，总灰分不得过10.0%，酸不溶性灰分不得过2.5%，水溶性浸出物不得少于8.0%，绿原酸不得少于0.2%，异绿原酸A不得少于0.6%。     

凉血通瘀方干预高血压大鼠急性脑出血模型对脑组织中差异miRNA表达的影响＊

目的 研究凉血通瘀方对高血压大鼠急性脑出血模型脑组织miRNA表达的影响，对差异表达的miRNA靶基因进行分析，探索凉血通瘀方可能的药效机制。方法 将自发性高血压大鼠随机分成对照组（B）和实验组（C）。适应性饲养一周后，C组灌胃凉血通瘀方，B组灌胃等体积生理盐水，连续5天，每天1次。构建脑出血模型后收集脑组织，借助全转录组测序技术获得miRNA表达量，与miRBase数据库比对获取已知miRNA，使用miRDeep2预测新miRNA。差异分析软件为DESeq2，筛选阈值为|log₂FC| ≥1 并且P <0.05。对显著差异表达的miRNA进行靶基因预测，对靶基因进行GO功能、KEGG通路富集和PPI网络分析。结果 实验组和对照组对比，共发现21个显著差异表达的miRNA，上调有9个，下调有12个，共预测得到1243个有统计学意义的靶基因。GO富集分析发现，生物过程中突触囊泡分泌的调节、神经递质分泌的调节和神经递质运输的调节占前三位，神经元投射终点、全膜、质膜区域和细胞投射则是主要的细胞成分。分子功能分别为小GTPase绑定、底物特异性跨膜转运蛋白活性和离子跨膜转运体活性。通路分析结果显示，靶基因在癌证通路、pI3K-Akt信号通路、人类乳头瘤病毒感染、神经活性配体-受体相互作用和MAPK通路等分布广泛。采用STRING网站和Cytoscape软件，根据MCC算法筛选出ADRA2C、CASR、CCL28、CCR1、DRD2、GNAT3、GRM2、DYNC1LI1、GABBR1、GNAI1等核心靶基因。结论 凉血通瘀方对脑出血急性期鼠脑组织内miRNA的表达有重要影响；显著差异表达miRNAs可能通过靶向核心基因调控凉血通瘀方干预急性脑出血的病理过程及预后。